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通用型反相液相色譜柱實際樣品分析步驟
  • 更新日期:2016-09-22     信息來源:本站      瀏覽次數(shù):2695
    • 通用型反相液相色譜柱實際樣品分析步驟:
      確保流動相潔凈,每隔24-48小時就應新配水相流動相,并同時更換或仔細清洗流動相溶劑瓶,以避免流動相長菌。確保實驗室純水系統(tǒng)工作正常。
      確保樣品不含顆粒型雜質(zhì)。如樣品過臟,或有微粒存在,需要考慮適合的樣品制備方法。在使用樣品過濾器時,確保濾膜為0.22 μm,且與樣品溶劑*兼容(不發(fā)生溶解)。也可考慮使用高速離心法去除顆粒性雜質(zhì),例如8000 rpm轉(zhuǎn)速以上離心20分鐘后,移取樣品上清液進樣。
      確保樣品溶液與流動相條件兼容,進樣后不會發(fā)生沉淀、或溶劑不互溶情況。通常使用流動相或比流動相洗脫強度弱的溶液(即有機溶劑比例較低)溶解或稀釋樣品,這樣可以獲得的峰形和檢測靈敏度。
      如系統(tǒng)在線混合生成流動相,預先檢查流動相各組分的兼容性。
      通用型反相液相色譜柱的操作使用限度。如果所使用的流動相條件、柱溫、以及樣品溶液條件,不利于色譜柱壽命時,請使用保護柱以延長柱壽命。
      在使用流動相進行柱平衡之前,如果流動相中含有可能析出的緩沖鹽,先使用5倍柱體積的有機溶劑-水溶液進行過渡。
      在常規(guī)分析過程中,每針或間隔若干針清洗柱內(nèi)可能積累的污染物。完成分析后,*清洗色譜柱,除去柱內(nèi)緩沖鹽和污染物。
      在色譜柱使用過程中,定期進行柱效測試,記錄塔板數(shù)與壓力,從而追蹤監(jiān)控色譜柱的性能變化。柱效測試方法應固定。
      通用型反相液相色譜柱應保存于合適的高比例或100%有機相(如乙腈或甲醇)中。如色譜柱使用于高溫或PH條件,或停用色譜柱超過72小時,用100%乙腈保存色譜柱。
      使用原配的柱堵頭,確保堵頭擰緊以避免柱內(nèi)溶劑揮發(fā)。取放色譜柱時避免磕碰掉落。

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