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【解決方案】如何準確檢測食品中PG、TBHQ、BHA和BHT?
發(fā)布日期:2024/8/1
GB 5009.32-2016

食品中4種抗氧化劑的測定

QuE-HPLC法


 

抗氧化劑是指能阻止或延緩食品氧化變質、提高食品穩(wěn)定性和延長貯存期的食品添加劑,作用機理主要為清除自由基,通過阻斷或抑制油脂氧化過程中某一階段,從而達到抑制油脂氧化的效果。

 

長期過量使用抗氧化劑會對人體健康造成危害,PG可導致腎臟受損或接觸性皮炎等,TBHQ可能有致癌作用,世界衛(wèi)生組織國際癌癥研究機構公布的致癌物清單中,BHA和BHT分別被列為2類致癌物和3類致癌物。因此加強食用油及含油制品中PG、TBHQ、BHA和BHT的監(jiān)管檢測非常必要。

 

迪馬科技依據(jù)《GB 2760-2024 食品安全國家標準 食品添加劑使用標準》中規(guī)定油脂中PG、TBHQ、BHA、BHT的最大使用量,食品安全國家標準《GB 5009.32-2016 食品安全國家標準 食品中9種抗氧化劑的測定 第一法 高效液相色譜法》中定量限要求,參考國標建立了《食品中4種抗氧化劑的測定》,樣品經乙腈飽和的正己烷溶解,使用正己烷飽和的乙腈提取,ProElut® QuEChERS AOD專用凈化管凈化,Diamonsil® Plus C18色譜柱分離檢測;回收率在80%~110%之間。

 

本方案與國標相比,增加了提取使用的溶劑體積,這樣可以更好地使抗氧化劑從油脂中提取出來,凈化方式使用QuEChERS方法,在保證回收率和除油效果的同時,大大降低了凈化所需時間。

 

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1、適用范圍

本方案適用于花生油、大豆油、玉米油、葵花籽油、橄欖油、調和油、芝麻油、棕櫚油、豬油、餅干、油炸果仁、麻花、方便面、薯片、火腿、燕麥片和花生罐頭中PG、TBHQ、BHA和BHT的測定,定量限為20mg/kg。

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2、標準品配制

(1)單標儲備液10000μg/mL,稱取適量單標,用乙腈配制成10000μg/mL的單標儲備液。

 

(2) 混標中間液2000μg/mL,分別吸取2mL單標儲備液10000μg/mL于10mL容量瓶中,用乙腈定容至刻度,配制成2000μg/mL的混標中間液。

 

(3) 混標中間液200μg/mL,分別吸取0.2mL單標儲備液10000μg/mL于10mL容量瓶中,用乙腈定容至刻度,配制成200μg/mL的混標中間液。

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3、提取

(1)取1.0g樣品,加入2.5mL正己烷(乙腈飽和),渦旋混合1min,使樣品完全溶解,靜置10min。加入20mL乙腈(正己烷飽和),渦旋振蕩提取10min,靜置5min,6000rpm離心5min,取出下層乙腈層;

 

 

(2) 向殘渣中再加入20mL乙腈(正己烷飽和),按步驟(1)重復提取兩次,合并三次提取液,混勻,取30mL,待凈化。

注:火腿、花生罐頭樣品需加入2g無水硫酸鈉使之分散,攪拌均勻后,再加入2.5mL正己烷(乙腈飽和過)。

 

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4、凈化

ProElut® QuEChERS AOD凈化管 (Cat.#: 64740)

將待凈化液加入到50mL ProElut® QuEChERS AOD凈化管中,渦旋混合1min,8000rpm離心5min,取15mL上清液于帶刻度的玻璃離心管中,在40℃水浴下通入氮氣吹至小于1mL,用乙腈定容至1mL,渦旋混勻,在-4℃下冷凍30min,取上層清液過0.45μm PTFE濾膜,上機分析。

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5、分析條件

色譜柱:Diamonsil® Plus C18, 250x4.6mm, 5μm (Cat.#: 99403)

流速:1.0mL/min

進樣量:5μL

柱溫:35℃

檢測器:PDA 280nm

流動相:A:甲醇   B:0.5%甲酸水溶液

梯度設置:

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6、添加回收結果及譜圖

花生油、大豆油、玉米油、葵花籽油、橄欖油、調和油、芝麻油、棕櫚油、豬油、餅干、油炸果仁、麻花、方便面、薯片、火腿、燕麥片和花生罐頭中PG、TBHQ、BHA和BHT的HPLC檢測添加回收結果。

添加濃度400mg/kg(加標量: 2000μg/mL,0.2mL)

添加濃度200mg/kg(加標量: 2000μg/mL,0.1mL)

添加濃度20mg/kg(加標量: 200μg/mL,0.1mL)

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更多圖譜詳見迪馬科技。

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7、注意事項

  • 做加標回收實驗,樣品提取時,渦旋混合的強度應在2000rpm以上,樣品與提取溶劑充分地混合,有利于提高目標物的提取效率。

  • 經QuEChERS凈化后的上清液,需要濃縮至小于1mL,剩余的液體不宜過少,以免造成回收率損失。

  • 棕櫚油等樣品,在提取、凈化、濃縮、定容后,油脂會隨著時間的推移逐漸析出,需要增加一個靜置冷凍的過程,冷凍時間嘗試過5、10、20、30、60分鐘,隨后取出過濾,上機分析,經過20小時靜置后觀察樣品瓶中的液體狀態(tài),發(fā)現(xiàn)定容后的液體在5、10、20分鐘后,樣品瓶中的液體還會繼續(xù)有油脂析出,冷凍30、60分鐘后,樣品瓶中的液體,油脂停止析出,最終確定冷凍時間30分鐘為最佳時間。

  • 固體類樣品,當樣品中含有少量水分時,需要加入無水硫酸鈉將樣品分散。相比國標方法中加入飽和氯化鈉溶液,實驗證明,加入無水硫酸鈉,樣品分散性更好。

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8、相關產品信息

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